《表1 引物序列信息:CYP4F2基因多态性对心脏机械瓣膜置换术后患者华法林初始剂量的影响》

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《CYP4F2基因多态性对心脏机械瓣膜置换术后患者华法林初始剂量的影响》


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所有入选患者利用EDTA抗凝管留取血样4 mL保存于低温冰箱备用。根据试剂说明书利用TIANamp Genomic DNA Kit(Tiangen Biotech,Beijing,China)提取患者DNA样品。利用Taqman SNP Genotyping assay(C_16179493_40,Applied Biosystems)在ABI 7500 Real TimePolymerase chain reaction(RT-PCR)System(Applied Biosystems)上检测CYP4F2的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。10μL PCR反应体系:95℃2 min,(95℃15 s,60℃30 s,68℃30 s)×30 cycles,68℃10 min,4℃forever。除此之外,我们还检测了所有患者的CYP2C9(rs1799853,rs1057910)和VKORC1-1639(rs9923231)的基因型,方法同上(PCR反应条件除外退火温度外均相同),具体引物(引物合成公司为Thermo Fisher Scientific)和退火温度参考表1。