《表3 荧光原位杂交体系：基于荧光原位杂交的‘燕山红栗’核型分析》

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《基于荧光原位杂交的‘燕山红栗’核型分析》

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荧光原位杂交程序按李杨（2015）的方法稍加改进。杂交前，将双链的DNA探针和靶DNA分别变性为单链的DNA探针，将变性后的杂交液覆盖于染色体分裂相标本上（表3），探针的变性温度为95℃，10 min。而染色体的变性时间和温度为75℃，5 min。然后在37℃，50%的甲酰胺2伊SSC条件下进行杂交。在杂交结束时，洗涤载玻片以除去过量杂交产物，用乙醇（75%，95%，100%）梯度洗脱。杂交后的玻片用DAPI复染，通过荧光正置显微镜（Olympus BX51，日本）镜检，观察探针在染色体上的信号位点。利用Photoshop CS6对基因位点进行拼接，获得图片，并分析。