《表1 shCCAT2引物序列》

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《lncRNA CCAT2对宫颈癌CaSki细胞增殖及周期的影响》


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提取细胞RNA,反转录合成cDNA,设计引物进行PCR扩增获取目的基因片段,引物序列如下:CCAT2-F,GCTCTAGACCGAGGTGATCAGGTGGA;CCAT2-R,CGGGATCCGTCTTCTGGGCTGATGTT。设计CCAT2干扰靶序列,获取干扰基因片段。shCCAT2引物序列见表1。采用内切酶Xho I和Bam HI双酶切过表达质粒,采用Bam HI和Xba I双酶切干扰质粒,与目的基因重组,筛选阳性表达重组质粒,采用LipofectamineTM2000转染试剂,将重组质粒DNA转入细胞中,转染24 h后检测转染效率,采用qPCR法检测细胞中CCAT2相对表达水平。