《表1 qPCR引物序列和siRNA序列》

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《长链非编码RNA TUG1对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响》

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将AGS细胞以1×105/孔的密度接种于12孔板，贴壁12 h后，换无血清培养基并进行转染；36 h后弃培养基，加入TRIzol收集细胞，并按照厂家说明书提取细胞总RNA，用微量紫外分光光度计测量RNA浓度和纯度，用1%琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性。将RNA浓度调一致并用反转录试剂盒按照说明将RNA反转录成cDNA。然后以cDNA为模板，用SYBR Green 1荧光染色进行qPCR扩增，用到的基因特异性引物序列列在表1中。反应条件为94℃5min，然后94℃30 s、60℃30 s、72℃30 s，共40个循环。用β-actin做内参，结果用2-ΔΔCt方法计算。