《表1 用于荧光定量的引物序列》

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《基于RNA-seq筛选不同饲养模式下肉鸡肌肉发育代谢相关差异基因》

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根据NCBI中的基因序列，通过Primer Premier.5软件对不同饲养模式下的差异基因PHGDH、ASNS、JPH2以及随机选取的2个任意基因LDHA、BLOC1S4以及内参基因GAPDH进行引物设计，引物由杭州有康生物技术有限公司合成，具体序列如表1。将反转录合成的cDNA模板，加入已验证好的引物进行10μL体系的荧光定量PCR反应分析，反应体系：Eva Green 2x qPCR Master Mix 5μL，Forward Primer 0.3μL，Reverse Primer 0.3μL，cDNA 3.5μL，ddH2O 0.9μL；qPCR程序：95℃3 min，95℃10 s，60℃30 s，进行39个循环，每个样本3个重复。采用2-△△CT法计算相关基因的相对表达水平。