《表1 用于荧光定量PCR分析的引物》

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《菠萝Dof转录因子在己醛延缓果实黑心病发生中表达分析》

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利用荧光定量PCR分析Dof家族基因在己醛处理减轻菠萝果实黑心病中的表达模式。根据各基因序列，采用Primer 5.0软件设计特异引物，以Acactin（编号HQ148720）为内参（表1），在LightCycler?480 II型实时荧光定量PCR仪上使用SYBR?Premix Ex TaqTM进行PCR扩增。反应体系为20μL：上下游引物各1μL，cDNA模板1μL，2×SYBR?Premix Ex TaqTM 10μL，超纯水7μL。扩增程序为94℃预变性3 min；94℃30 s，55℃20 s，72℃30 s，共40个循环。AcDof家族成员在各样品中的相对表达量通过Livak和Schmittgen[28]方法计算，基因表达量的差异显著性采用SPSS软件的One-way ANOVA进行分析。