《表1 Taqman-MGB探针位置》

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《不同地区妊娠期女性叶酸代谢障碍风险及其相关基因多态性的研究》

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2．样本采集及DNA检测方法:（1）样本采集:使用专用采样拭子采集口腔黏膜上皮脱落细胞。该方法无创、无交叉感染、操作简单方便。（2）检测设备:采用美国Applied Biosystems公司的7900型荧光定量PCR仪，检出率可达99%以上，可重复性达到100%。（3）基因分型技术:采用荧光定量PCR技术，对MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G进行基因分型。每个样品检测孔中加3.5μl去离子水，1μl浓度为20ng/μl的DNA模板，0.5μl的20×TaqmanMGB和5μl的2×Taqman Universal Master Mix探针，探针信息详见表1。PCR反应初始温度为95℃10min，92℃15s、60℃1min扩增20个循环，最后用89℃15s、60℃90s扩增30个循环。结束后，根据各反应孔的荧光，确定各样本基因分型结果。