《表3 引物序列信息：Toll样受体4(TLR4)基因剔除小鼠构建及初步表型分析》

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《Toll样受体4(TLR4)基因剔除小鼠构建及初步表型分析》

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Cas9 mRNA和sgRNA混合物注射C57BL/6小鼠受精卵，注射后受精卵移植到假孕雌鼠中完成胚胎发育，对出生的F0代小鼠，剪尾抽提基因组，PCR方法鉴定F0代小鼠的基因型。TLR4基因敲除F1代杂合子小鼠（TLR4-/+）由F0代阳性小鼠与C57BL/6野生型小鼠交配获得，鉴定引物对P1/P2序列信息见表3。PCR条件为:94℃/3min；35个循环的95℃/30s，56℃/15s，72℃/2min；72℃/5min。F2代TLR4基因敲除纯合子小鼠TLR4-/-由F1代杂合子小鼠自交获得，基因型鉴定策略同F1代小鼠。