《表3 信号肽的氨基酸序列及来源》

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《不同信号肽对人鼠嵌合CMV-IgM分泌表达的影响》


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从已报道文献中选取高效表达外源蛋白质的5种分泌型信号肽序列(表3),以构建好的CMV-MH-pCMV3为模板,分别利用引物Sig(A-E)-HF、H-R扩增目的基因,获得带有5种不同信号肽(A-E)的人鼠嵌合CMV-IgM重链基因序列。采用同样方法,以CMV-L-pCMV3为模板,分别利用引物Sig(A–E)-LF、L-R获得5′端带有不同信号肽的轻链目的基因;分别将带有不同信号肽的CMV-IgM重/轻链目的基因片段与载体pCMV3经HindⅢ和XbaⅠ酶切,并连接获得带Sig(A–E)信号肽的人鼠嵌合CMV-IgM表达载体,将融合不同信号肽的目的基因进行测序,验证其正确性。