《表1 引物序列：lincRNA-p21靶向miR-17-5p抑制非小细胞肺癌的增殖》

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《lincRNA-p21靶向miR-17-5p抑制非小细胞肺癌的增殖》

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转染后48 h，收集四组细胞，按照TRizol提取RNA试剂盒说明书方法提取细胞总RNA:lincRNA-p21mRNA检测用MMLV逆转录试剂盒合成cDNA，采用SYBR Green试剂盒进行荧光定量PCR扩增，反应体系20μl(cDNA模板4μl，SYBR Green 10μl，上、下游引物各1μl，DEPC-H2O 4μl），反应条件为95℃预变性30 s，95℃变性5 s，58℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环。miR-17-5p mRNA相对表达采用Reverse Transcription kit逆转录为cDNA，使用SYBR Green进行qRT-PCR分析，qRT-PCR反应条件为95℃45 s，56℃30 s，72℃3 min，共40个循环。采用2-ΔΔCt法计算目的基因的相对表达水平。引物序列见表1。