《表1 MS培养基母液配方表》

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《新课程下高师生“植物组织培养实验”的教学实践》


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实验课前,要求学生做好实验课的预习工作,认真熟悉实验步骤,记录预习中的问题。对实验配制哪些药品,提前列出清单发给学生,学生查阅资料了解如何配制,提前了解需要注意的地方和计算的地方,使学生上课前心里有一定的概念,不至于茫无是从。独立操作配制培养基母液是每个学生应该具备的,为了减少称量误差,提高培养基配制的效率及准确性,将MS在培养基配方基础上扩大一定的倍数,配成浓缩液。每个班级配制一套母液,采取分组使每个学生参与配制,6个组分别配制大量元素,微量元素,有机元素,铁盐溶液,植物生长调节剂及1mol/L HCl和1mol/L NaOH。MS培养基母液的配制方案(见表1),但需注意:(1)大量元素有5种化合物,防止放置后有沉淀析出,配制母液倍数为10倍,考虑到Mg+,Ca2+,SO42-和PO43-之间容易发生反应产生沉淀,所以每种要单独溶解,CaCl2单独配制,其它4种化合物放在一起,分别定容至1000ml。(2)微量元素有7种化合物,为了称量方便,配制母液为1000倍,每种化合物最好单独溶解后再混合定容至1000ml。(3)有机元素有5种有机物,放置时间久后,试剂瓶里容易滋生菌类,所以有机元素母液一次不需配制太多,配制母液倍数为100倍,混合溶解定容至500ml。(4)铁盐有2种化合物,配制母液倍数为200倍,配制铁盐溶液要细心认真,2种化合物单独加热溶解后,再混合加热,为防止以后沉淀析出,要充分的加热螯合,再定容至1000ml。(5)植物生长调节剂类,常配制成浓度1mg/ml。细胞分裂素类如6-BA和KT等,先称取0.1g,用少量的1mol/L NaOH溶解后,再定容至100ml。生长素类如NAA,IAA和2,4-D等,也先称取0.1g,用少量的1mol/L HCl溶解后,再定容至100ml。所有母液应当用蒸馏水配制。