《表4 研究中所用18对SSR引物信息》

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《玉兰亚属及其近缘种植物遗传多样性分析》

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41对SSR引物序列取自外文文献（表4）（Isagi et al.，1999；Setsuko et al.，2005），由睿博兴科公司合成。SSR引物的5'端加M13（序列:TGTAAAACGACGG CCAGT）接头，并用FAM（蓝色）荧光染料标记。通过设置比例梯度试验，确定M13引物、5'端加有M13接头序列特异正向、反向引物的最适摩尔比例为1∶3∶4。筛选41对引物在SSR反应体系中的最佳退火温度，每对引物以文献中参考温度为中心、±4℃为梯度与玉兰样本DNA进行PCR扩增（图4A）。所用DNA MarkerⅠ分子量标为100～500 bp，琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物质量。最终筛选出能跑出多态性条带的可用SSR引物18对。以来自不同亚属的样品DNA模板，筛选能够特异性识别的引物。同种SSR引物在不同样品内的扩增条带显示出不同大小（图4B）。