《表1 研究所用引物:二化螟P-糖蛋白基因的克隆、序列分析及在阿维菌素处理下的表达模式》

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《二化螟P-糖蛋白基因的克隆、序列分析及在阿维菌素处理下的表达模式》


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(4)实时定量分析。根据克隆获得的两个P-糖蛋白基因cDNA序列,使用Primer-BLAST分别设计qPCR引物,以EF-1α作为内参基因[19],引物信息见表1。PCR扩增体系为10μL,包括5μL 2×TB Green Premix Ex Taq II,1μL cDNA,0.4μL上游引物,0.4μL下游引物和3.2μL ddH2O,在CFX96 Touch荧光定量PCR仪选用两步法程序进行PCR扩增。