《表1 本研究所用引物：中国对虾V-ATPase c亚基基因的克隆及其在高pH胁迫下的表达分析》

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《中国对虾V-ATPase c亚基基因的克隆及其在高pH胁迫下的表达分析》

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根据克隆获得的FcVHA-c基因cDNA序列，利用引物设计软件Primer Premier 5.0设计qRT-PCR引物c-F1，c-R1（表1）。提取处理后鳃组织的RNA，使用HiScript?II Q RT SuperMix for qPCR（gDNA wiper）（诺唯赞，南京）试剂盒进行反转录。使用ChamQTM SYBR?Color qPCR Master Mix试剂盒（诺唯赞，南京），和7500 Real Time PCR System（ABI，美国）仪器检测高pH胁迫后和干扰后该基因在鳃中的表达变化规律，并筛选该基因的最佳干扰靶点；使用2–??Ct法计算目的基因相对表达量，使用Excel软件进行单因素方差分析，使用OriginPro 2016软件作图。