《表1 PCR引物的名称及序列》
以欧洲花楸和陕甘花楸叶片为检测对象,采用RAPD技术对其遗传差异性检测。RAPD是建立在PCR(Polymerase Chain Reaction)基础上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。以基因组DNA为模板,单个人工合成的随机多态核苷酸序列(通常为10个碱基对)为引物,在热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)作用下,进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性,扩增产物的多态性反映了基因组的多态性。基因组DNA提取采用改良CTAB法。PCR扩增反应体系:10×PCR Buffer 10μL、2.5mmol/L dNTPs 2μL、10μmol/L引物1μL、1.25U/μL Taq酶0.3μL、4ng/μL DNA 1μL,加ddH2O补足25μL。PCR引物见表1。扩增条件:94℃预变性4min;94℃变性30s,36℃退火30s,72℃延伸2 min,44个循环;72℃延伸10 min。1.5%琼脂糖凝胶电泳。
图表编号 | XD00117249900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.15 |
作者 | 佘萍、马杰、贾宝光、余治家、王正安 |
绘制单位 | 宁夏农林科学院固原分院、宁夏农林科学院固原分院、宁夏农林科学院固原分院、宁夏农林科学院固原分院、宁夏农林科学院固原分院 |
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