《表1 SRAP-PCR引物名称及序列》

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《毛樱桃与李子杂交新品种的早期鉴定》

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DNA的提取采用CTAB法。毛樱桃ד晚黄李”后代F1-2及其亲本各取2g冷冻的嫩叶在液氮中研磨，65℃水浴0.5h，混匀。加入氯仿/异戊醇（CI），混匀，放置10min，12 000r·min-1离心10 min，重复2次；-20℃静置30 min；12 000r·min-1离心10 min，弃上清液，70%乙醇冲洗沉淀3次，晾干。加50μL TE溶解DNA，同时加入1μL RNase，37℃反应1h，利用琼脂糖凝胶电泳法测定DNA浓度。SRAP分析:SRAP引物采用张琪静[11]已发表UCD-CH11、UDP98-412的2对序列及1对随机引物A1（表1），引物由北京康普森生物有限公司合成。扩增反应在美国Abi Veriti型基因梯度PCR仪上进行。扩增体系如下:反应体积20μL，H2O12.7μL，2.4μL Mg2+（15mmol·L-1），0.8μL dNTPs（2.5mmol·L-1），1.5μL引物（5μmol·L-1），0.1UTaq DNA聚合酶（5U·μL-1），2.5ng模板DNA（15 ng）。扩增程序为:94℃预变性5min；94℃变性1min，34℃复性1min，72℃延伸1min，33个循环；72℃延伸9min。PCR产物经6%的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。重复3次。