《表2 氟尿嘧啶配置浓度梯度(单位:um/L)》

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《槐耳清膏在人结肠癌HCT116细胞株中对肿瘤干细胞的作用研究》


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置备同浓度(105/ml)的HCT116及肿瘤干细胞悬液,以100 ul/孔接种于96孔板(第一列孔不接种细胞,加入相同体积的DMEM高糖培养基)后置细胞培养箱内培养24小时。同时配置各浓度梯度的槐耳清膏液和氟尿嘧啶液(具体浓度梯度见表1、表2),封口标记后置于4℃冰箱内备用。24小时后取出96孔板,吸尽每孔中的培养液后,以每组8个复孔、每孔100 ul向有细胞的孔内加入各浓度梯度的药液,做好标记后置于细胞培养箱内再培养72小时。以DMEM:CCK-8=10:1配置检测液,72小时后从培养箱内取出96孔板,吸尽培养液,以每孔100 ul加入检测液。待各组出现明显颜色差异时上酶标仪检测OD值,记录数据并计算肿瘤细胞抑制率。细胞抑制率=(OD对照组-OD实验组)/(OD对照组-OD空白组)×100%,实验重复3次,并画出相应的浓度-抑制率曲线。