《表1 PCR扩增引物系列》

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《腺病毒载体介导的PTEN基因对黑色素瘤SK-MEL-3细胞化疗敏感性的影响》

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以pcDNA3.0-PTEN重组质粒为模板，加入PTEN引物（表1），通过PCR扩增带有GFP标记基因的pAdTrack-ployA-promoter（AdV）空载体质粒和PTEN基因。将纯化产物用HindIII、SaII进行双酶切，回收目的基因片段，加入T4-DNA连接酶连接过夜，采用CaCl2法转化DH5a感受态细胞，挑取Ad V-PTEN重组腺病毒质粒，采用PCR、双酶切和测序鉴定。本研究中所有病毒和细胞实验均符合实验室病毒和细胞管理和使用原则。