《表2 实时定量PCR引物序列及参数》
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《低出生重对仔猪肝脏抗氧化功能的影响及精氨酸的营养效应》
总RNA的提取按照试剂盒(Trizol Reagent,TakaPa,日本)操作说明进行,RNA质量检测使用核酸蛋白检测仪(Beckman DU-800,CA,美国)于260nm检测,A260/A280表示RNA的纯度,该比值在1.8~2.0说明RNA纯度较好。cDNA的合成按照逆转录试剂盒(Prime ScriptTMregent kit,TaKaRa,日本),反应结束后-20℃保存待用。利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)搜索基因序列,运用Primer 5进行引物设计,由上海生工生物工程公司合成,引物序列见表2。用实时定量PCR仪(ABI7900HT Real-Time PCR System,ABI,美国)进行测定,反应荧光染料为SYBR Green I(TaKaRa,日本)。反应体系为10μL:5μL SYBR Premix Ex TaqTMII(2×),0.5μL上游引物,0.5μL下游引物,3μL双蒸水,1μL cDNA模板。以β-actin和18sRNA(取两者CT值的几何平均值)为内参基因,使用2-ΔΔCT方法计算目的基因的相对表达量。
图表编号 | XD0073481400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.28 |
作者 | 田一航、宋毅、陈代文、余冰、何军、虞洁、毛湘冰、罗玉衡、黄志清、罗钧秋、郑萍 |
绘制单位 | 四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部重点实验室、四川农业大学动物营养研究所、动物抗病营养教育部 |
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