《表1 实验中用到的荧光定量引物序列》

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《二十碳五烯酸和亚油酸对黄姑鱼肝脏细胞炎症相关基因表达的影响》

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注:TLR:Toll样受体，MyD88:髓样分化因子88，TNF-α:肿瘤坏死因子α，IL-1β:白细胞介素1β，IL-6:白细胞介素6，SOCS3:细胞因子信号转导抑制因子3，β-actin:β肌动蛋白.

实时定量PCR按照之前实验方法进行[7]。PCR反应使用荧光试剂为SYBR Premix Ex TaqTM（Takara，中国），反应条件为:预变性95℃10 min，一个循环；变性95℃15 s，引物退火56～60℃15 s，引物延伸68℃30s，40个循环。溶解曲线:95℃15 s，58℃15 s，95℃15 s。检测TLR2、TLR3、TLR22、MyD88、TNF-α、IL-1β、IL-6、SOCS3和β-actin基因的表达量，其中β-actin是内参基因。每个样本包含3个技术重复，结果取平均值作为该样本的最终数值。实验使用转录组序列进行设计（表1）。计算基因相对表达量采用2-△△CT法[8]。