《表1 不同横向流速的多糖分子特性》

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《非对称场流分离检测鲍内脏多糖》

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横向流速的大小是影响AF4系统分离效率的主要因素[9]。图1分别是不同横向流速鲍内脏多糖AF4-RI、AF4-SLS和AF4-PDA分离图谱。流动相为0.05 mol/L Na NO3[含0.02%（W/V）Na N3]，鲍内脏多糖浓度为1 mg/m L，分离体系检测速度为0.5 m L/min，进样时间为4 min，进样体积量为20.3μL，横向流速分别为3、5、6和7 m L/min，设空白对照组，进样品为流动相。由图1可知，空白对照组检测信号并无显著波动，无杂峰。在横向流速为3和5 m L/min时，RI和SLS的样品峰和空隙峰（不保留物质，如流动相溶液等）[17]的分离并不明显，样品在进样结束后就洗脱出来；当横向流速为7 m L/min时，样品峰与空隙峰分离完整，但峰扩宽现象加剧，而且样品峰高度明显变低（图1a、b）。横向流速过大，会使得颗粒更靠近累积壁面，与腔室分离膜相互作用加剧，从而引起样品洗脱延迟[18]。图1c表明PDA的峰型并未受横向流速变化的影响，但出峰时间会随流速增大略微后移。样品在280 nm处具有吸收峰，表明其含有蛋白质组分。当横向流速为6 m L/min时，样品峰与空隙峰能较好地分开，样品扩峰较小[19]，峰型完整。因此，AF4横向流速为6 m L/min时，多糖分离效果最佳。分子表征结果见表1，由表1可知，横向流速为3、5、6和7 m L/min时，多糖的Mw、均方根旋转半径（RMS radius）及均方根旋转半径对摩尔质量斜率（RMS plot slope）结果差异显著，说明多糖分子量及分子构象的计算结果受AF4系统分离效果的影响。