《表1 引物序列:DNCB诱导TRPA1基因敲除小鼠特应性皮炎模型的建立与评价》

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《DNCB诱导TRPA1基因敲除小鼠特应性皮炎模型的建立与评价》


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于21 d时取下实验组与对照组背部皮肤,采用Trizol Reagent提取总RNA,紫外线分光光度计测定RNA浓度。以总RNA为模板,按照Thermo反转录试剂盒说明书进行c DNA的合成,然后以Sybr Green作为荧光标记物进行PCR反应。反应条件为:预变性(95℃10 min);PCR反应(40个循环;95℃15 s;60℃60s)。并增加溶解曲线:60℃→95℃,每15 s升温0.3℃。所有反应均设立3个复孔,以GAPDH为内参照,结果采用2-△△Ct值表示。具体引物序列见表1。