《表1 RT-q PCR特异性引物序列》

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《ZFP36和Rasd1的mRNA鉴别生前、死后挫伤的意义》

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使用Agilent 2100生物分析仪（Agilent Technologies，Palo Alto，USA）确定RNA的完整性（RIN）并进行质量控制和浓度检测。使用Primer Script RT试剂盒（Ta Ka Ra，Japan）获得总RNA的c DNA拷贝。通过Illumina Eco实时PCR系统和SYBR green kit（Ta Ka Ra，Japan）实施RT-q PCR相关操作。以GAPDH作为RT-q PCR的内参，通过2-△△Ct方法比较损伤组与对照组之间m RNA相对表达量。在本次实验中，RT-q PCR采用10μl反应体系，各试剂配比为RNase-free H2O:2×Realtime PCR Mix：正向引物（10μM）：反向引物（10μM）:c DNA=3:5:0.5:0.5:1。热循环参数如下：首先在95℃预变性30s，然后进行40个循环（95℃变性5s→62℃引物退火30s→72℃延伸30s），最后进行三个时间为15s的95℃溶解曲线。基因特异性引物等其他信息参见表1。