《表1 大鼠Nrf2、HO-1 m RNA探针ID》

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《艾灸对卵巢储备功能减退大鼠Nrf2/HO-1信号通路的影响》

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(5）实时PCR(Taq Man探针）法检测大鼠卵巢组织Nrf2、HO-1 m RNA表达：每组取3只大鼠的右侧卵巢组织，研碎后采用Trizol法提取总RNA，逆转录合成c DNA，再使用荧光定量PCR检测试剂盒进行PCR反应。PCR反应体系（20μL）：模板c DNA 1μL，2×荧光定量探针法反应预混液10μL，20×探针和扩增引物预混液1μL，RNase-free H2O 8μL。反应条件：95℃预变性10 min；95℃变性10 s，60℃退火延伸1 min，扩增40个循环，在退火、延伸步骤中采集荧光信号。以GAPDH作为内参，采用相对定量法（2-ΔΔCt）计算每组m RNA的相对表达量。目标基因及内参基因的引物由美国Applied Biosystems公司设计，产品编号见表1。