《表2 表达菌株的构建:一种利用甘氨酸氧化酶生产乙醛酸的方法》

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《一种利用甘氨酸氧化酶生产乙醛酸的方法》


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提取经过Thi O基因片段扩增、酶切连接和筛选验证等分子操作构建成功的重组质粒。将重组质粒p ET-28a(+)-Thi O转化入E.coli BL2l(DE3)感受态细胞,经卡那霉素LB平板筛选;将重组质粒p GEX-6P-1-Thi O、p COLDI-Thi O转化入E.coli BL2l(DE3)感受态细胞,经氨苄霉素LB平板筛选;将重组质粒p P43NMK-Thi O转化入Bacillus subtilis 168感受态细胞,经卡那霉素LB平板筛选,见表2。挑取阳性克隆子,经过菌落PCR验证获得包含Thi O基因的4株表达菌株:E.coli BL2l(p ET-28a(+)-Thi O)、E.coli BL2l(p GEX-6P-1-Thi O)、E.coli BL2l(p COLDI-Thi O)及Bacillus subtilis 168(p P43NMK-Thi O)。