《表2 鉴别当雄高山牦牛肉的引物信息》

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《基于单核苷酸多态性位点的多重实时荧光定量聚合酶链式反应法鉴别当雄高山牦牛肉》

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注：标有下划线的碱基为SNP位点；标有边框的碱基为错配碱基；/.无SNP位点。

将筛选出的SNP位点作为鉴别当雄高山牦牛引物的3′端，将11个SNP位点（表2）分别设计在8对引物中并分组到3个反应体系中，包括2个三重反应体系（A、B）和1个二重反应体系（C）。为了提高当雄高山牦牛引物的特异性和抑制非特异性扩增，引物设计过程中引入碱基错配理念[31]，在部分引物SNP位点的前一位引入错配碱基（表2):DX-P2-R引物中由碱基T变为A；DX-P4-R引物中碱基A变为C；DX-P5-R引物中碱基G变为T；DX-P7-R引物中碱基A变为T。引物合成委托英潍捷基（上海）有限责任公司进行。