《表2 基准回归结果:饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响》

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《饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响》


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采用Primer 5.0软件设计引物,PCR引物序列见表2。以cDNA为模板,采用荧光定量PCR技术检测肝脏中脂质合成相关基因SREBP-1c、FAS、ACC、SCD1 mRNA的表达量。PCR反应体系为10μL:5μL SYBR Premix Ex Taq(TaKaRa,日本)、0.4μL上游引物、0.4μL下游引物、1μL cDNA、3.2μL ddH2O。PCR扩增条件为:95℃预变性30 s;95℃变性5 s,在各基因最佳退火温度下退火20 s,共40个循环;PCR后绘制熔解曲线以判断扩增产物的正确性,温度以每5 s 0.5℃的速度从60℃上升到95℃。以β-肌动蛋白(β-actin)为内参基因,对得到的各样品Ct值进行均一化处理,在各目的基因与β-肌动蛋白的扩增效率基本一致条件下,以对照组基因mRNA的表达量为基准,通过2-ΔΔCt法计算相关基因mRNA的表达量。