《表2 小鼠胰腺Kras、Trp53及Smad4基因突变统计 (n=50)》

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《肥胖小鼠胰腺组织肿瘤相关基因突变频率的分析》

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人和小鼠Kras、Trp53和Smad4的基因结构见图2A，本研究中扩增的小鼠胰腺Kras、Trp53和Smad4这3个基因序列所编码的多肽序列与人类该序列编码的多肽序列高度同源，氨基酸序列同源性分别达到100%、82%和98%。COSMIC数据库显示[1 0]，人类这3个基因中，Kras基因第2外显子、Tp53基因第8外显子和Smad4基因第9外显子存在多个突变频率高的位点，因此本研究也选择性扩增相应序列。3个基因片段PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果见图2B，Kras、Trp53和Smad4基因的PCR产物长度分别为537、543和526 bp。两次测序结果均显示，高脂食物组50个胰腺扩增样本中，Kras基因均有1个样本存在突变。突变位置为Kras基因CDS序列的第96位碱基，由T突变为C（c.96T>C），为第32位密码子的同义突变（p.Tyr32Tyr），结果见表2。DNA测序峰图见图3，未检测到突变的样本，测序峰为单峰，检测到点突变的峰图由T峰和C峰共同构成，说明此DNA样本中存在以C为模板的序列。经小鼠基因组多态性检查，该位点不存在单核苷酸多态性。我们同时对50个普通食物组胰腺Kras样本进行了测序，但未发现任何突变。另外，高脂食物组胰腺中未检测出Trp53和Smad4基因的突变。