《表2 水牛RAPD引物序列》

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《RAPD标记鉴别四个水牛品种的初步研究》


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根据陈集成等的报道(陈集成等,2014;宋娜娜等,2016;鲁云风,2005,河南农业大学,pp.13-23),选择合成57条RAPD引物,每个品种随机选择10个样本DNA,稀释混合为一个反应池(表2)。以混合反应池为模板,使用touchdown PCR程序对RAPD引物进行筛选,每条引物重复扩增3次。PCR扩增体系为2×Taq PCR Mastermix 6.25μL,ddH2O 4.25μL,RAPD引物1μL,DNA模板1μL。扩增产物用2.1%琼脂糖凝胶电泳检测,选择3次重复PCR产物稳定、条带清晰明亮、不同品种间区别明显的引物进行下一步研究。