《表2 实时定量RT-PCR的主要基因序列》

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《穿心莲内酯通过影响SIRT3-p53信号通路诱导鼻咽癌C666-1细胞凋亡的机制研究》

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细胞给予50μmol/L穿心莲内酯处理24 h之后，弃去培养基后用Trizol试剂提取细胞中的总RNA，再使用一步式逆转录试剂盒逆转录，将所得c DNA用作实时定量PCR的模板，使用实时定量PCR试剂盒，通过CFX96 Real-Time System（Bio-Rad公司）进行mRNA表达水平的测定.扩增条件是在95℃下15 min，然后是95℃下30 s，55℃下1 min和72℃30 s，经历40个循环.最后以GAPDH的引物作为内参对照，分别检测Sirtuins家族成员（SIRT1-7）和GAPDH的表达水平变化.所有实验均重复3次SIRT1-7和GAPDH的引物序列见（表2）.