《表1 基因的引物序列:壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应》

《表1 基因的引物序列:壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应》


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将bMECs接种于6孔板中,在37℃、5%CO2培养箱中培养至细胞达到90%融合以上,更换为含不同浓度(0、31.250、125.00和250.00 mg/mL)CTS的细胞培养液继续培养24 h,随后接种S.agalactiae(MOI=50∶1)继续培养6 h。总RNA提取试剂盒提取细胞总RNA,然后采用cDNA合成试剂盒反转录为cDNA,反应条件为37℃,15 min;85℃,5s。RT-PCR反应采用两步法,条件为95℃预变性30 s,1个循环;95℃延伸5 s,60℃退火30 s,40个循环。基因的引物序列见表1,由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。