《表2 本研究所用引物序列》

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《血根碱对LPS诱导后黄鳝免疫应激及肠道炎症相关基因表达的影响》


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黄鳝肠道内参基因RPL-17、白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)、白介素-12β(IL-12β)、白介素-15(IL-15)、生长转化因子-β1(TGF-β1)、生长转化因子-β2(TGF-β2)和生长转化因子-β3(TGF-β3)引物序列见表2,通过查找NCBI上的基因序列,并用Primer Premier 5软件设计引物,引物均由上海生工有限公司合成。Real Time PCR反应体系12.5μL(SYBR 6μL,Forward primer 0.5μL,Reverse primer 0.5μL,cDNA 0.5μL,RNase Freed H2O 5μL),95℃预变性30 s,95℃变性5 s,55℃退火25 s,72℃延伸15 s,40个循环,70~95℃收集数据60 s。运用表达量E=2-ΔΔCT方法进行计算,其中ΔΔCT=(CT目的基因?CT内参基因)实验组?(CT目的基因?CT内参基因)对照组[17]。