《表2 六种组合断裂反应活性比较》

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《断裂内含肽介导的蛋白纯化系统的构建》

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注：“-”在A、B组中表示反应未完成；在F组中表示反应时间太短无法精确测量

将3种N片段和两种CG片段两两组合，共形成6种不同的断裂反应组合，分别命名为A、B、C、D、E、F。各个组合断裂结果如图6所示。通过分析发现，结构不同的N和CG片段相互作用时，其断裂速率各不相同，呈现一定的规律性。其中，组合F的断裂速率最快，小于1 min的时间内就可以达到90%以上的断裂速率。而文献[7]构建的纯化体系为了达到相同的断裂速率需要花费30 min以上的时间。可能是因为Cys替代CBD标签在三维空间结构上减少了两片段之间结合阻力，加速断裂反应的进行。为了更直观的比较不同组合断裂时所需要的时间，本文将6中不同组合的断裂速率总结成表2。