《表3 突变前后CRE作用力变化》

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《饱和突变提高肌酸酶热稳定性》


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研究表明,蛋白质分子的热稳定性、催化活性的变化与蛋白质分子间作用力的种类和数量有关[20]。为分析突变体热稳定性提高的原因,构建了A.nicotianae CRE结构模型并用在线软件Protein Interaction calculator(http://pic.mbu.iisc.ernet.in/job.html)分析CRE分子间作用力的变化。如表3所示,突变体K195V、K195T、K195L较WT分别增加2、3、4个疏水作用力。研究表明,疏水作用力是影响蛋白稳定性的重要因素,降低蛋白表面的疏水性或者增强分子内部的疏水性有利于蛋白质的稳定[21-22]。因此,疏水作用力的增加极有可能是CRE热稳定性提高的一个原因。此外,突变体K195V、K195T、K195L较WT分别增加了7、12、13个氢键。文献[23]研究表明增加一个氢键可提供0.6 kcal·mol-1的能量,且氢键增加是酶分子稳定性增加的重要原因之一[24]。因此,氢键的增加可能是CRE热稳定性提高的重要原因。