《表1 各引物序列及终浓度》
实时荧光定量法测端粒相对长度,以及端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)和端粒结合蛋白-三肽肽酶1(tripeptidyl-peptidase 1,TPP1)相对表达量。配制25μL反应体系,包括:(1)12.5μL 2×Mix;(2)上游和下游引物(首先将引物稀释成10μmol/L);(3)样本2.5μL(最终体系中DNA量为100 ng);(4)无酶水补充至25μL。每个样品均设置3个复孔。反应条件均采用两步法:95℃10 min预变性,95℃15 s、60℃1 min共40个循环,随后以0.4℃的梯度升温行融解曲线分析。应用2-ΔΔCt法计算端粒相对长度和各目的基因的相对表达量。引物序列见表1。
图表编号 | XD00105526000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.15 |
作者 | 徐之丽、张赛、涂悦、吴焕成、刘洋 |
绘制单位 | 中国人民武装警察部队特色医学中心神经修复医学科、中国人民武装警察部队特色医学中心脑科中心、中国人民武装警察部队特色医学中心脑科中心、天津市北辰医院脑系科、上海市闵行区中心医院神经内科 |
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