《HIV-1耐药基因在河北省不同流行人群中的分布》

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科学技术领域:该项目是预防医学与卫生学领域的科研项目,成果主要应用于艾滋病防治工作。立项背景:自1989年发现首例艾滋病以来,河北省HIV正由高危人群通过桥梁人群向普通人群扩散,感染人数呈现逐年上升趋势,HIV基因型趋于多样化,耐药毒株也在不断出现,艾滋病防控形式非常严峻。该项目通过基因型检测和分子流行病学的方法对HIV-1突变基因及其耐药性和HIV-1基因型在河北省输血、性接触、母婴等不同流行人群中的分布特点进行了分析。通过系统发育树分析不同亚型的起源。对预防和控制艾滋病、减少社会危害、维护社会稳定等具有重要意义。主要技术内容及创新点:采集不同人群HIV-1感染者和参加治疗病人抗凝静脉新鲜血液,测定CD4细胞数和病毒载量,并对他们进行随访,了解病人治疗方案、服药依从性、临床表现等情况。通过RNA提取、RT-PCR,电泳、序列测定等现代分子生物学手段确定HIV-1亚型和基因突变情况,将实验结果与史坦福大学数据中的国际参考株进行比对,分析HIV-1耐药毒株的基因耐药突变位点、耐药种类、耐药程度及基因亚型等在该省输血、性接触、儿童、病人和感染者等不同人群中的分布特点。构建HIV-1env、gag、pol区基因系统进化树,分析亚型流行和基因重组情况,寻找不同亚型的起源。通过pol基因序列分析传播性耐药(TDR)和选择性耐药。该项目的创新点在于:一、从分子水平描述了HIV-1基因亚型进化、耐药基因突变位点及耐药性在MSM、输血人群、儿童、性接触等不同流行人群中的分布特点与流行规律;二、建立起了河北省耐药检测监测体系和系统进化分析的新方法,可用于追踪监测耐药突变规律、预测艾滋病的流行趋势;三、对比分析治疗人群与未治疗人群中HIV-1基因突变情况,并将经典流行病学与分子流行病学实验相结合分析产生耐药突变的影响因素。技术经济指标:项目选取血浆病毒载量大于1000拷贝/ml以上的112份样本和21名新诊断HIV-1阳性的MSM作为研究对象,利用HIV-1耐药基因型检测法提取HIV-1RNA,并通过RT-PCR的方法扩增到112份目的基因片断,测定其pol区基因序列,与史坦福耐药数据库比对发现在112例HIV-1感染者/AIDS患者中,有61例发生了主要耐药突变,其中有2例患者体内蛋白酶抑制剂次要耐药突变和逆转录酶抑制剂主要耐药突变共存。另外8例均出现了蛋白酶抑制剂次要耐药突变,发现B、CRF01_AE、CRF07_BC、C亚型等多种流行毒株,它们分布在不同的人群中。通过对21例MSM HIV-1gag、pol和env区序列分析确定了新诊断MSM感染者中HIV-1基因亚型的分布和TDR及基因型起源。成果对河北省创新性防控措施的制定具有重要意义。应用推广与效益:在国内外核心期刊发表论文8篇,其中SCI一篇。研究成果达到国内领先水平,已在河北10个市区得到广泛应用,建立和优化了适应该省不同流行人群的多亚型HIV耐药基因检测监测体系,为提高抗病毒治疗效果、减少艾滋病的病死率提供科技支撑。成果的应用最大限度地提高了抗病毒治疗效果、改善了HIV/AIDS患者的生存质量、降低了耐药毒株的传播。对制定创新性防控策略、切断传播源头及维护社会稳定等具有重要意义。

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