该项目是研究“五味子乙素通过TRPC1通道抑制支气管哮喘气道平滑肌重塑”。在明确机制的基础上，课题组用五味子乙素联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂（160/4.5ug）治疗哮喘患者，取得满意的临床疗效。

主要技术内容：

1.课题组构建Wistar大鼠支气管哮喘动物模型，造模结束后用大鼠肺功能仪测定对照组和哮喘组大鼠的肺功能，然后处死大鼠取肺组织进行HE染色，观察哮喘大鼠气道平滑肌细增殖和气道重塑情况。

2.分离对照和哮喘动物模型大鼠的气道平滑肌细胞（ASMCs），于常规条件下原代培养ASMCs，通过相差显微镜观察ASMCs呈“峰和谷”样生长状态，α-肌动蛋白免疫细胞化学染色阳性。

3.用qPCR和Western bolt检测并比较各组大鼠微小RNA-135a（miR-135a）表达，TRPC1 mRNA和蛋白的表达。

4.用MTT比色法和实时细胞分析仪测定ASMCs增殖活力，比较对照和哮喘组细胞增殖能力。

5.用双荧光素酶报告基因法证实miR-135a和TRPC1的关系，结果显示：miR-135a可以和TRPC1 mRNA结合，负向调节TRPC1表达。

6.用五味子乙素干预对照和哮喘组大鼠，干预结束后用大鼠肺功能仪测定各组大鼠肺功能，发现五味子乙素能减轻哮喘大鼠吸气和呼气阻力，这表明五味子乙素能减轻哮喘大鼠的病理改变。

7.用五味子乙素干预哮喘组大鼠ASMCs，发现五味子乙素可以明显上调miR-135a的表达，下调TRPC1 mRNA和蛋白的表达，抑制ASMCs的增殖能力。而用miR-135a抑制剂处理后再用五味子乙素干预，则消除了五味子乙素对ASMCs增殖的抑制作用，这说明五味子乙素通过miR-135a抑制TRPC1表达来抑制哮喘ASMCs增殖及ASMCs过度增殖所致的气道重塑。

8.在基础研究明确分子机制的基础上，课题组用五味子乙素联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗哮喘患者，分为常规治疗组和常规+五味子乙素联合治疗组，比较这两组患者在哮喘症状控制、急性发作次数、急救药物使用次数、再次住院率等方面的差异。

应用推广及效益：

课题组于2016.7月开始在全省范围内推广，截止2018.12.31日用五味子乙素联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗哮喘患者621人。常规治疗组：给予布地奈德福莫特罗粉吸入剂（160/4.5ug），1吸，2次/日，急性发作时吸入短效支气管舒张剂等急救药物。常规+五味子乙素联合治疗组：在常规治疗的基础上联合使用五味子乙素治疗，急性发作时吸入短效支气管舒张剂等急救药物。发现与常规治疗相比，联合治疗的哮喘患者症状控制更佳，人均急性发作次数和人均急救药物使用次数明显下降，再次住院率减少，取得了良好的社会效益。

成果说明

我们于2016.7月开始在全省范围内推广应用，在河南省人民医院、郑州大学第五附属医院和河南大学淮河医院等医院应用。我们用五味子乙素联合布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗哮喘（联合治疗）患者，观察与单用布地奈德福莫特罗粉吸入剂治疗哮喘（常规治疗）在症状控制、人均急性发作次数、人均急救药物使用次数和再次住院率等发面的差异。常规治疗组入组哮喘患者302例，治疗完成212例，脱失率：29.8%；联合治疗组入组哮喘患者621例，完成425例，脱失率：31.6%，联合治疗组患者总体哮喘控制率达75.6%，比常规治疗组提高1

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