《双试剂型连续监测法测定二胺氧化酶活性浓度的研究》

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该研究通过试验,确定DAO的测定方法以pH8.0、浓度为100mmol/L的Tris-HCl为反应缓冲体系,以3.2mmol/L丁二胺为最佳底物浓度,试剂I和试剂II按4:1与样品反应,在340nm波长(副波长410nm)下200-300s期间连续监测NADH吸光度的下降速率计算求得DAO的活性。该方法线性范围为0-100U/L,不精密度均小于5%,回收率分别为95.8%和98%,胆红素研究建立的DAO酶活性浓度双试型连续监测法灵敏度高、重复性好、抗干扰力强、诊断准确度良好,试剂稳定性满足日常工作需要、适合全自动生化分析仪批量检测,可作为临床常规检测方法,用于肠粘膜损伤的诊断。该研究通过实验建立DAO活性浓度连续监测方法,研制成双试剂型试剂,确定了全自动生化仪实验参数,可以应用于全自动生化仪,准确测定血清中DAO活性浓度,为了解严重烧伤或严重创伤后早期肠粘膜损害程度,探索保护肠粘膜的临床治疗方法提供诊断依据。该成果进一步推广到其他学科,还可对了解胎盘和胎儿发育状况,和肿瘤研究方面的研究起重要作用,其社会效益将更加显著。研制成的双试剂型试剂为DAO检测方法的标准化和今后试剂盒的研制开发打下基础,具有进一步商品化的前景。

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