《基于WNT信号通路研究清化固肾排毒方干预肾络病的分子机理》

点击下载 ⇩

该成果通过建立大鼠单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction)模型,检测wnt信号通路蛋白wnt1、β连环蛋白(β-catenin),α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)、转化生长因子-β1( TGF-β1)等蛋白及基因的表达,探讨清化固肾排毒颗粒对肾间质纤维化肾络病的保护作用。该研究将72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组采取单侧输尿管结扎,造模后再随机分为UUO模型组、洛丁新组、中药组,每组SD大鼠18只。中药组予以清化固肾排毒颗粒1.5g/kg.d溶于生理盐水中灌胃,西药组予以洛丁新片1.6mg/kg.d溶于生理盐水中灌胃,假手术组和模型组予以生理盐水灌胃,每日一次。分别于造模后的第7、14、21天时随机处死每组中的6只大鼠,检测血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,SCr)、并留取梗阻侧肾脏组织进行相关病理检测。分别采用苏木精-伊红染色法( hematoxylin-eosin staining, HE染色)和Masson染色评价肾小管损伤情况和肾间质纤维化程度,运用免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR以及Westem Blot技术检测肾脏组织wnt1、β-catenin、α-SMA、TGF-β1的蛋白和mRNA在肾组织中的表达情况。研究结果证实清化固肾排毒颗粒能够能够抑制大鼠肾脏α-SMA、TGF-β1蛋白和基因的表达,达到抗肾纤维化肾络病的作用;降低大鼠肾脏wnt1、β-catenin蛋白和基因的表达,抑制wnt信号通路中蛋白的表达,从而达到肾脏保护的作用。通过运用SD大鼠进行单侧输尿管结扎制作肾纤维化模型,用假手术组、模型组作为对照,应用清化固肾排毒颗粒和洛丁新对肾纤维化肾络病大鼠进行干预,分析实验结果,可以得出以下结论:

①、清化固肾排毒颗粒能改善UUO大鼠一般状态,降低大鼠血清BUN、SCr水平,缓解肾脏病理损害,对UUO大鼠肾脏具有一定的保护作用;②、清化固肾排毒颗粒能抑制TGF-β1、α-SMA等相关纤维化蛋白和mRNA的表达,缓解上皮细胞转分化的过程,从而达到抗肾纤维化肾络病的作用;③、清化固肾排毒颗粒能抑制wnt1、β-catenin蛋白含量和mRNA的表达,通过抑制wnt信号通路,达到抗肾纤维化的作用,这可能是清化固肾排毒颗粒发挥肾脏保护作用的机制之一。

④、该成果为临床上应用清化固肾排毒颗粒防治肾间质纤维化肾络病提供了实验理论依据。

  1. 下载详细PDF版/Doc版

提示:为方便大家复制编辑,博主已将PDF文件制作为Word/Doc格式文件。