《血必净对脓毒性急性肾损伤的保护作用和机理》

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(一)项目研究开发的主要内容:

该研究利用贴近临床的盲肠结扎穿孔(Cecal Ligation and Puncture,CLP)法复制脓毒症致AKI模型。选取健康雄性SD大鼠54只,随机分为3组:假手术组(Sham group)、盲肠结扎穿孔组(CLP group)、血必净组(Xuebijing group),术后2h阴茎背静脉注射血必净4ml/kg(天津红日药业股份有限公司产品),腹腔内注射37℃生理盐水(40ml/kg)抗休克治疗。三组分别在术后12h、24h、48h后检测腹主动脉血流(PBU)情况,取各组的血标本用ELISA法测定血清中的肌酐、尿素氮、肌酐清除率(CrCl)、TNF-α、IL-6、IL-10水平,取腹水做细菌定量培养,随即处死取血后的小鼠,并取出肝脏、肾脏,放入10%中性福尔马林中,固定24至48小时,石蜡包被,供光镜检测备用。TUNEL法原位检测凋亡细胞,免疫荧光染色法测定凋亡相关基因Caspase-3、Bax/Bcl-2、ROCK-1、MYPT-1的表达变化,形态分析、定量分析进一步来明确血必净对肾脏肾小管细胞凋亡的影响及作用机制。

(二)与国内外同类技术的比较:

1.国内外还没有用血必净应用与脓毒症导致AKI的基础实验研究报道,该研究用大鼠CLP导致的sepsis模型给药,获取标本首次从直观的组织形态学,细胞形态学方面来展示血必净的优越性,提供科学的实验基础,全面展示中药的优势。

2.该研究观察了相关凋亡因子Bax、Bcl-2、caspase-3的表达,并研究了Rho通路上对肾小管细胞凋亡的影响,已及血必净对脓毒症导致AKI的可能作用,这在国内外极为少见报道,为临床的推广应用提供实验基础,科学理论依据。

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