《一种烟草青枯病离体接种的人工发病方法》

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烟草青枯病在全球普遍发生,是烟草生产的毁灭性病害,许多与防病控害有关的基础研究和重大理论问题研究均离不开接种病菌人工发病这基本手段,特别是该病害的病原菌(Ralstonia solanacearum)是国际上研究植物病原细菌致病机制的模式系统之一,其致病性检测也少不了人工接种发病的工作。高效快捷的人工发病方法是许多学者的共同需求。该发明公开了一种烟草青枯病离体接种的人工发病方法,要点是在倾斜的培养皿内将烟草离体叶片接种烟草青枯病菌,导致叶片的叶脉组织坏死而表现出清晰的发病症状,实施方法步骤如下:用普通培养皿作接种用主要器具,清洁消毒后备用;按常规方法培育烟苗;用一般细菌培养基平板培养烟草青枯病菌,并用无菌水配成浓度适宜的细菌液作接种体;采集烟草叶片,裁切成略小于接种器具培养皿直径的叶片;将接种器具培养皿倾斜放置,打开皿盖,取裁切好的离体叶片展开放入培养皿内,叶片的基端置于培养皿的最低处;将配备的烟草青枯病菌接种细菌液注入已放置离体叶片的培养皿内,细菌液浸没叶片基部,盖回培养皿盖;将接种后的烟草叶片置于普通室内,在适宜的温度下培养。一般接种后2天开始表现叶脉坏死症状,4~6天后整个叶片全部坏死。该发明的优点是:所用器具简单,接种发病过程时间短,占用空间场地少;发病症状与田间症状一致,清晰易识别,重现性好;方法简易便捷,无需高难度的技术操作,工作效率高;接种发病局部条件容易控制,容易实现技术方法的标准化。

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