《桉树细胞培养物对水稻稻瘟病抗性研究》

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课题来源:该项目为广西自然科学基金项目“桉树细胞培养物对水稻稻瘟病抗性研究”(项目编号:2013GXNSFAA019074)的研究内容。项目背景:稻瘟病是水稻的重要病害,其防治方法以化学农药防治为主。化学农药的长期使用,容易使水稻产生严重的抗药性与农药残留问题。寻找对水稻稻瘟病原菌有控制作用的植物源生物农药是稻瘟病防治应用研究上的一个重要课题,对于水稻增产、粮食安全及环境维护之间的协同共进具有重要意义。桉树叶片提取物中含有多种抗虫、抗真菌成份, 将桉树应用于农用杀菌剂的研究尚处于起步阶段。通过进行桉树离体细胞培养物对水稻稻瘟病病原菌的抗性研究,可为工厂化生产桉树组织细胞培养物进行有机农药开发打下坚实基础。研究取得的主要创新性成果: 建立了邓恩桉、尾叶桉、赤桉三个桉树品种愈伤组织继代培养体系及侧芽增殖再生体系。在这一研究中,发现了培养基中植物生长调节剂噻苯隆(TDZ)及多胺的添加对桉树愈伤组织增殖与分化有重要促进作用。建立了不同桉树品种成年母株为外植体的侧芽增殖再生体系桉树工厂化组培快繁需要采用成年优良株的植体作为材料,以获得具相同的优良后代,但很多桉树的成年母株外植体在离体条件下腋芽难于萌发,即使萌发后,在以后的继代过程中也易于褐化死亡。该研究发现,添加一定浓度的TDZ有助于邓恩桉成年母株外植体腋芽萌发率与丛生芽发生率的提高,在所用浓度围内,腋芽萌发率达77.8-83.3%,丛生芽发生率达到57.1-60.0%。同时,通过继代初期4-6天的暗培养及培养基中抗氧化剂硫幸酸的加入,使继代中的褐化现象得以消除。建立了邓恩桉、尾叶桉、赤桉三个桉树品种细胞悬浮培养体系,在研究中明确了不同品种细胞悬浮培养中接种量、摇床转速、激素种类与配比、碳源种类与浓度等因素对细胞悬浮培养效果的影响,确定了不同品种细胞悬浮再生培养体系所需的技术参数。获得了细胞悬浮培养物、组培苗叶片抗菌粗提物提取流程与方法,并通过抗菌粗提物对水稻稻瘟病病原菌的抗性试验,找到了达到最佳抗菌效果所需的抗菌粗提物浓度、添加方法。

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