《壮药龙脷叶抗菌活性及化学成分研究》

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课题来源与背景:龙脷叶作为广西特有的壮药材资源,在壮医临床上广为使用。但是,由于缺乏对龙脷叶的基础研究,作为成药和工业化生产方面未得到有效开发。广西龙脷叶资源丰富,极具开发潜力。该项目系2013年广西自然科学基金面上项目。技术原理及性能指标:该项目对龙脷叶提取物进行抗菌活性的研究,筛选出对革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌、链球菌及革兰氏阴性菌中的大肠杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌等细菌生长具有明显抑菌作用的抗菌活性部位。采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI等各种色谱方法对龙脷叶提取物中具有抗菌活性的部位进行分离纯化,得到2个化合物,均为首次从该植物中分离;测定龙脷叶中18种基础氨基酸的含量,结果显示,龙脷叶总氨基酸总量达16.32%,说明龙脷叶含有丰富的氨基酸成分,其中谷氨酸(2.31%)含量最高,胱氨酸(0.08%)、蛋氨酸(0.06%)含量最低,其余15种氨基酸含量在0.27%~1.73%之间。采用TLC法对龙脷叶中L-谷氨酸、精氨酸、脯氨酸、亮氨酸等4种游离氨基酸进行定性鉴别,结果薄层鉴别分离度好,专属性强。通过正交试验优选龙脷叶中总游离氨基酸的提取工艺,以紫外-可见分光光度法测定六批龙脷叶水提物中总游离氨基酸的含量。技术的创造性与先进性:抗菌活性的研究:体外抗菌试验显示,龙脷叶水提物和50%乙醇提取物的正丁醇部位具有抗菌活性。化学成分研究:利用紫外光谱、质谱、红外光谱、核磁共振、LCMS-IT-TOF、UHPLC-Q/TOF MS QTOF等技术,确定已分离出的单一化学成分的结构,分别为1-棕榈酸单甘油酯(L-(-)-alpha-Monopalmitin)、咖啡因(Caffeine),均为首次从该植物中分离。龙脷叶中氨基酸总量达16.32%,说明龙脷叶含有丰富的氨基酸成分。以紫外-可见分光光度法测定六批龙脷叶中总游离氨基酸含量,最高达6.77%(以谷氨酸计),不同批次间的含量差异较大,含量最高和最低相差近2.5倍。提示龙脷叶中总游离氨基酸的含量受产地、采收时间等因素影响较大。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为龙脷叶药材质量标准的建立和以龙脷叶为主要原料的单、复方制剂的研究奠定了基础,扩展了龙脷叶的临床适应症,为龙脷叶的工业应用提供依据。该项目按照合同阐述的研究内容和考核指标完成,申请发明专利2项,在国家级核心期刊发表论文1篇。应用情况及存在的问题:龙脷叶化学成分和生物活性的研究,能有效解决龙脷叶在质量控制标准制定、新药研究和工业应用方面面临的诸多问题。

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