《表1 siRNA序列:DUSP6通过负向调控ERK1/2通路抑制IBV的增值》
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《DUSP6通过负向调控ERK1/2通路抑制IBV的增值》
将H1299细胞按照5×105个孔接种于6孔板,培养至细胞密度达到60%时进行siRNA转染试验。取两个EP管分别加入250μL的Opti-MEM培养基,其中一个加入5μL的转染试剂Lipofectamine 2000,另一个EP管加入5μL 20 mmol/L的siRNA,室温静置5 min。将上述两管轻柔混匀,室温静置20 min,形成siRNA/Lipofectamine 2000复合物。预先铺好细胞的6孔板用预冷的PBS清洗3遍,每孔加入1 mLOpti-MEM培养基,并将siRNA Lipofectamine 2000复合物加入到6孔板中,混匀,置于37℃、5%CO2培养箱培养4 h后弃上清,加入含1%FBS的RPMI1640培养基继续培养32 h,收取蛋白样品,采用Western blot检测相应蛋白的表达情况以确定干扰效果。
图表编号 | XD0099237900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.10 |
作者 | 王欢、丁铲、刘定祥、廖瑛 |
绘制单位 | 中国农业科学院上海兽医研究所、中国农业科学院上海兽医研究所、华南农业大学群体微生物中心、中国农业科学院上海兽医研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |