《表1 引物序列:鲎血G因子的原核表达》

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《鲎血G因子的原核表达》


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注:引物3188-01F及3188-01R划线位置为BamHⅠ及SacⅠ酶切位点;引物3189-01F及3189-01R划线位置为BamHⅠ及HindⅢ酶切位点。

根据GenBank中登录的鲎血G因子序列(NO.D16622.1及NO.D16623.1)分析其抗原表位,按大肠埃希菌偏好对成熟肽编码序列进行优化,序列肽大小分别为1 965及837 bp。根据G因子α亚基的编码基因序列设计引物,由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。引物序列见表1。引物经PCR扩增,纯化后的产物及pET32asumo载体经双酶切,回收酶切产物,用T4 DNA连接酶连接后转化至感受态E.coli DH5α中,提取质粒,命名为p ET32a-sumo/factorG-α及pET32a-sumo/factorG-β,经PCR鉴定,并送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。