《表1 不同细胞数量形成的斑点个数》

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《牛结核γ-干扰素ELISPOT检测方法建立》

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将细胞数用RPMI-1640培养基稀释，每孔加入50μL培养基与50μL牛外周血单个核细胞悬液[1]，含细胞数量分别为1.25×105/孔、2.5×105/孔、1.25×106孔。将96孔滤膜板置于37℃、5%CO2培养箱培养16 h。其他步骤均按照2.3.1中操作程序。结果所得斑点数分别为69、116、142，见图1、表1，随着细胞数量增加斑点数也明显增多。1.25×106孔形成的斑点数目过多，背景连片无法区分特异性与非特异性斑点，故选用1.25×105孔的细胞数量。见表1。