《表1 香石竹DcHsfB1基因克隆和表达分析引物》

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《香石竹热激转录因子基因DcHsfB1的克隆及其对不同非生物胁迫的表达响应》

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以香石竹基因组序列为参考序列，利用引物设计软件Primer 5.0设计目的基因DcHsfB1开放阅读框（open reading frame，ORF）扩增特异性引物Dc Hsf B1-F与DcHsfB1-R（表1），以香石竹cDNA为模板进行PCR扩增。PCR反应体系为:2μL 10×PCR Buffer、0.1μL Ex Taq聚合酶（5 U·μL-1）、1.6μL dNTP（2.5 mmol·L-1）、正向和反向引物（10μmol·L-1）各1μL、1μL cDNA，ddH2 O补足20μL。PCR反应程序为:94°C预变性5 min→（94°C变性30 s→60°C退火30 s→72°C延伸1 min）35个循环→72°C延伸10min→4°C保存。