《表1 检测干细胞多能性和分化相关基因的RT-PCR引物序列》

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《建立植入前遗传学检测人胚胎来源的无动物源性干细胞系》

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用Ⅳ型胶原酶将h ESC从人成纤维细胞饲养层（human fibroblast cell feeder，HFF）上消化下来，转移至低粘附性的6孔板中培养。分化培养试剂由体积分数80%DMEM、体积分数20%FBS、1 mmol/L L-glutamine、0.1 mmol/Lβ-mercaptoethanol和1 mmol/L MEM nonessential amino acids组成。经过7～10 d的悬浮培养后，在显微镜下观察类胚体的形成。收集到类胚体后，提取RNA检测分化相关基因Reduced Expression 1 (REX-1）、sex determining region Y-box2 (SOX-2）、Lin-28 homolog A (LIN 28）、Nucleophosmin-1 (NPM1）和Growth Differentiation Factor 3 (GDF3）的表达（表1）。