《表1 引物序列表：皮肤创面无机诱导活性敷料对难愈合性创面I型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达的影响》

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《皮肤创面无机诱导活性敷料对难愈合性创面I型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达的影响》

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将冷冻于-80℃的组织标本取出，采用Trizol提取组织中总RNA，逆转录获得cDNA，并以c DNA为模板，应用Power SYBR Green PCR Master Mix Kit进行qPCR扩增。具体反应体系为:SYBR Green PCR Master Mix（2X）12.5μl，前引物（10μmol/L）1μl，后引物（10μmol/L）1μl，模板c DNA 2μl，加入ddH2O至总体积为25μl。反应条件为:预变性（95℃）10分钟，变性（95℃）10分钟，退火（60℃）20秒，延伸（72℃）30秒，循环40次。应用ABI 7500荧光定量PCR仪对反应产物进行定量检测，分别进行3次平行实验。采用CT法比较实验组和对照组的变化，即先算出△Ct值（△Ct为目的基因相对于内参基因的表达强度），即△Ct=目的基因的Ct值-内参基因的Ct值；再将目的基因的表达差异计算出来，即处理样本相对于未处理样本的倍数（2-△△Ct），-△△Ct=-（△Ct处理样本-△Ct未处理样本）。当2-△△Ct>1，即目的基因表达上调，反之则下调。引物序列见表1。