《表1 sg RNA正链及反向互补链序列》

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《转录因子JunD在HIV-1前病毒DNA转录调控中的作用研究》

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利用sg RNA在线设计工具http://crispr.mit.edu/预测的JunD靶点序列，挑选得分最高的3条序列并插入Bsm BⅠ的末端碱基及U6启动子必需的碱基G，合成sg RNA正链及反向互补链（表1）。将互补的sg RNA寡核苷酸单链退火形成双链。将得到的sg RNA双链片段克隆至Bsm BⅠ酶切线性化的plenti-CRISPRv2载体中[9]，构建慢病毒敲除质粒plenti-CRISPRv2-hu JunD-sgRNA，并经测序鉴定。